Pré-avaliação e Otimização do Sistema Elecsys® de
Imunoensaio da Tireóide por Eletroquimiluminescência

Peter B.Luppa^1,4, Stefan Reutemann¹, Ursula Huber¹, Rudolf Hoermann², Stefan Poertl², Stefan Kraiss³, Sabine von Bülow³ e Dieter Neumeier¹

Resumo

Apresentamos os resultados de uma pré-avaliação do teste da função tireóide de tiroxina livre, de triiodotironina livre e de terceira geração TSH usando o sistema de imunoensaio por eletroquimiluminescência Elecsys®

Foi feito um estudo de campo colaborativo entre o centro de desenvolvimento do fabricante e um laboratório de química clínica,dedicado à confiabilidade e comparabilidade dos novos ensaios do Elecsys® para estabelecer métodos sob as condições do laboratório clínico usando amostras na rotina de teste in vitro da tireóide.Formulações preliminares (referência) dos reagentes e diversos modelos piloto de eletroquimiluminescência foram usados para medições de ensaios,tanto nos centros de pesquisa do fabricante como no cenário clínico.

Os novos ensaios da tireóide foram comparados aos respectivos ensaios do Enzymun-Test® realizados no analisador de imunoensaio automático ES 300.Foi usado o padrão do WHO na padronização do TSH,considerando um equilíbrio no método de diálise aplicado a triiodotironina livre.O ensaio da tiroxina livre foi padronizado em comparação com o ensaio tiroxina livre Enzymun-Test®, os quais têm sido previamente calibrados com relação ao equilíbrio da diálise.

O objetivo deste estudo de campo foi o de sustentar a otimização da tecnologia empregada no Elecsys® em um estágio inicial de desenvolvimento e,desde modo, preparar a base para a adaptação dos imunoensaios para o analisador de acesso aleatório final Elecsys® 2010.Uma subseqüente avaliação multicentro demonstrou que as exigências da rotina do teste tireóide em termos de confiabilidade foram satisfeitas pelo sistema.

Palavras-chave:Eletroquimiluminescência, imunoensaio, tireóide,testes diagnósticos,Elecsys®

A automação do imunoensaio é um ponto importante para o laboratório (1).Há forte interesse na seleção e utilização de analisadores de imunoensaio automáticos,particularmente por razões do aumento no número de testes que são solicitados ao mesmo tempo e nas limitações de custo.Desde modo,a automação e integração dos sistemas de imunoensaio são necessárias.Ao mesmo tempo são requeridas a alta sensibilidade analítica,velocidade e flexibilidade de imunoensaios (8).

A introdução de um novo diagnóstico com uma tecnologia de detecção de análise baseada na eletroquimiluminescência foi recentemente concluída através do Igen Inc.Boehringer Mannheim,usando a tecnologia para o desenvolvimento do sistema Elecsys®.

Neste estudo de campo usando o modelo piloto Elecsys®,o desenvolvimento do ECL como uma técnica de quantificação e detecção foi testado por sua habilidade em satisfazer os critérios que são requeridos nas sucessivas medições dos níveis de análise do 4 soro.Diversos componentes do sistema ECL foram otimizados e refinados durante o período de pré-avaliação;adicionalmente,diversas interferências a partir da matriz do soro foram investigadas.A técnica provou ser maleável robusta até o momento,sensível e reprodutível.

O ECL aplicado para os ensaios da tireóide fT3, fT4 e TSH fornece um método capaz de usar uma molécula com marcador de peso molecular baixo estável,o qual permita amplificação de sinal com alta sensibilidade e faixa dinâmicas maiores. Os ensaios revelaram excelente sinal de linearidade e foram capazes de usar um modo de reação fase fluído resultando em curtos períodos de incubação e ótima performance.Por meio disso,o estudo de pré-avaliação dos ensaios de tireóide do Elecsys® ECL prepararam a forma para um estudo de avaliação multicentro usando o analisador Elecsys® 2010 final (4).

Concluindo, o pré-avaliado e automatizado imunoanalisador Elecsys®, de acesso randômico,como um modelo piloto neste estudo de campo provou ser muito satisfatório,ambos no aspecto analítico e de confiabilidade.Os ensaios da tireóide Elecsys® reúnem maiores especificações esperadas nos ensaios modernos.O estudo de amostra clínica confirmou que o ensaio TSH é um teste muito sensitivo para a detecção de sub-clínica,assim como o hiper e hipotireoidismo.Os hormônios T3 e T4 livres produziram a informação complementar,especialmente requerida para a diagnose sobre os estados de hipotireóide.

Autor correspondente:Priv.Doz.Dr.med.Peter B.Luppa, Institut für Klinische Chemie und Pathobiochemie,Klinikum rechts der Isar der TU München,Ismaninger Straße 22, D.81675 München,Germany.